Development and production of recombinant thermostable phytase

ในอุตสาหกรรมการผลิตอาหารสัตว์กระเพาะเดี่ยว สัตว์เหล่านี้ไม่สามารถย่อยไฟเตทที่มีอยู่ในอาหารสัตว์ให้ออกมาอยู่ในรูปของฟอสเฟตที่สามารถดูดซึมมาใช้ประโยชน์ได้ดังนั้นการผลิตเอนไซม์ไฟเตสจึงมีความเหมาะสมในการนำไปผสมกับอาหารสัตว์ นอกจากนี้ในกระบวนการผลิตอาหารสัตว์มีขั้นตอนที่จะต้องผ่านความร้อนสูง รวมไปถึงการขนส่งและการเก็บรักษาเอนไซม์ก็จะมีค่าใช้จ่ายสูงหากเอนไซม์ทนร้อนได้ไม่มากพอ ดังนั้นเพื่อป้องกันการเสียสภาพของเอนไซม์และลดค่าใช้จ่ายดังกล่าวจึงมีการพัฒนาเอนไซม์ให้มีคุณสมบัติในการทนความร้อนและมีกิจกรรมของเอนไซม์ที่อุณหภูมิสูง การวิจัยครั้งนี้จึงมีวัตถุประสงค์ เพื่อออกแบบและผลิตเอนไซม์ไฟเตสให้มีประสิทธิภาพในการทนความร้อนโดยอาศัยระบบ Escherichia coli production ในการผลิต โดยทำการออกแบบยีนของเอนไซม์ให้มีคุณสมบัติในการทนร้อน ตัดต่อเข้ากับ Vector แล้ว Transformation เข้า Cloning host เพื่อทำการเก็บรักษาและเพิ่มจำนวน Recombinant plasmid  จากนั้นจะทำการสกัด plasmid ออกมาแล้ว Transformation เข้าสู่ expression host เพื่อผลิตโปรตีน เมื่อทำการเลี้ยงจุลินทรีย์ให้มีการเจริญแล้วจึงใช้กระบวนการ IPTG induction จึงเกิดการผลิตโปรตีนสะสมเป็น intracellular phytase แล้วจึงทำการสกัดโปรตีนออกมาโดยใช้เครื่อง Sonicator ทำให้เซลล์แตก และได้โปรตีนที่ต้องการในรูปของ crude protein จากนั้นมาทำการหาคุณลักษณะของเอนไซม์ที่ผลิตได้ สำหรับงานวิจัยนี้เมื่อได้เอนไซม์ไฟเตสที่มีคุณสมบัติตามที่ต้องการแล้วคาดว่าจะมีการประชุมเผยแพร่ระดับนานาชาติ