Analysis of Instability Phenomena at Current Interruption in Vacuum Arc Discharge Compared with Silver or Copper Electrode
บทความในวารสาร
ผู้เขียน/บรรณาธิการ
กลุ่มสาขาการวิจัยเชิงกลยุทธ์
ไม่พบข้อมูลที่เกี่ยวข้อง
รายละเอียดสำหรับงานพิมพ์
รายชื่อผู้แต่ง: Kamata N., Mungkung N., Kinoshita H., Yuji T.
ผู้เผยแพร่: Nature Research
ปีที่เผยแพร่ (ค.ศ.): 2019
วารสาร: Nature Communications (2041-1723)
Volume number: 47
Issue number: 4
หน้าแรก: 1774
หน้าสุดท้าย: 1780
จำนวนหน้า: 7
นอก: 2041-1723
eISSN: 2041-1723
ภาษา: English-Great Britain (EN-GB)
ดูในเว็บของวิทยาศาสตร์ | ดูบนเว็บไซต์ของสำนักพิมพ์ | บทความในเว็บของวิทยาศาสตร์
บทคัดย่อ
There is an urgent need for affinity reagents that target phospho-modified sites on individual proteins; however, generating such reagents remains a significant challenge. Here, we describe a genetic selection strategy for routine laboratory isolation of phospho-specific designed ankyrin repeat proteins (DARPins) by linking in vivo affinity capture of a phosphorylated target protein with antibiotic resistance of Escherichia coli cells. The assay is validated using an existing panel of DARPins that selectively bind the nonphosphorylated (inactive) form of extracellular signal-regulated kinase 2 (ERK2) or its doubly phosphorylated (active) form (pERK2). We then use the selection to affinity-mature a phospho-specific DARPin without compromising its selectivity for pERK2 over ERK2 and to reprogram the substrate specificity of the same DARPin towards non-cognate ERK2. Collectively, these results establish our genetic selection as a useful and potentially generalizable protein engineering tool for studying phospho-specific binding proteins and customizing their affinity and selectivity. ฉ 2019, The Author(s).
คำสำคัญ
ไม่พบข้อมูลที่เกี่ยวข้อง
ติดต่อสอบถามเพิ่มเติมได้ที่